Las especies silvestres, (Genoma StStJJJJ), sirven como un valioso recurso de germoplasma que proporciona genes novedosos para la mejora del trigo. En el estudio actual, se aplicaron hibridaciones in situ de fluorescencia no desnaturalizante (ND-FISH) con múltiples sondas y marcadores moleculares comparativos para caracterizar dos adiciones cromosómicas de trigo. La ND-FISH secuencial con nuevas sondas de oligoetiquetado específicas se utilizó para determinar con precisión la constitución cromosómica de los anfiploides parciales de trigo y las líneas de adición Hy36 y Hy37. Los resultados de ND-FISH mostraron que los cromosomas translocados J-St añadidos en Hy36 tenían señales menores de ADN ribosomal 5S oligo, mientras que un par de cromosomas J-St en Hy37 tenían señales mayores de Oligo-pTa71 y menores de ADN ribosomal 5S. El arreglo de SNP de 90K y los marcadores moleculares basados en PCR que se mapearon en los grupos de ligamiento 5 y 3 del trigo facilitaron la identificación de las introgresiones cromosómicas en las líneas de adición, y confirmaron que los cromosomas añadidos en Hy36 y Hy37 eran 5JS.3StS y 5JS.3StS, respectivamente. Las secuencias de codificación completas en los loci parálogos de puroindolina-a () de fueron clonadas y localizadas en el brazo corto del cromosoma 5J de Hy36. La línea Hy36 mostró una reducción en el índice de dureza, lo que sugiere que las secuencias génicas específicas de pueden estar asociadas con el rasgo de suavidad en el fondo de trigo. La identificación citogenética molecular de los derivados novedosos de trigo- indicó que se produjeron reordenamientos cromosómicos frecuentes en las progenies de hibridación de trigo-. Las nuevas líneas derivadas de trigo- pueden aumentar la diversidad genética para la cría de trigo.