Un paso clave en el estudio de la patología de los árboles es la identificación de un método apropiado para inocular patógenos de enfermedades en ramas y troncos. Los patógenos de enfermedades en ramas y troncos se inoculan comúnmente a través de perforación, quema e inoculación con palillos. Sin embargo, hay una falta de análisis comparativos de los resultados de inoculación de estos tres métodos. En este trabajo, se inocularon variedades de seis años utilizando técnicas de perforación, quema y palillos para investigar las diferencias en la efectividad de estos métodos de inoculación. Los resultados revelan que la tasa de incidencia fue del 93.55% en el grupo de inoculación con palillos, significativamente más alta que el 80.65% en el grupo de inoculación por quema (chi-cuadrado, = 90, = 0.007), mientras que la inoculación por perforación mostró respuestas patológicas significativas en las etapas tempranas, con curación espontánea en la etapa posterior. Además, la inoculación con palillos fue más eficiente en inducir cancros al inocular el patógeno en la parte inferior del árbol, con un menor espaciamiento intra e inter-fila (densidad de plantación) proporcionando mejores resultados que un mayor espaciamiento intra e inter-fila. Los resultados de este estudio demuestran que la inoculación con palillos es una opción óptima para estudiar la inoculación artificial en variedades de seis años, proporcionando apoyo técnico para la investigación sobre enfermedades del álamo y ofreciendo una base teórica para la inoculación de otras enfermedades en la rama y el tronco.