Las técnicas de diseño asistido por computadora y fabricación asistida por computadora (CAD/CAM) se basan en métodos sustractivos (fresado de bloques prefabricados) o aditivos (impresión 3D), y ambos se utilizan para obtener materiales dentales. Nuestro estudio in vitro tuvo como objetivo investigar el comportamiento de los fibroblastos gingivales humanos expuestos a muestras fresadas a base de metacrilato (MA) en comparación con las muestras impresas en 3D a base de MA para esclarecer mejor los mecanismos de adaptabilidad y supervivencia celular. La proliferación de fibroblastos gingivales humanos se midió después de 2 y 24 horas de incubación en presencia de estas muestras utilizando un ensayo de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio, y la integridad de la membrana se evaluó a través de la liberación de lactato deshidrogenasa. El nivel de especies reactivas de oxígeno, la expresión de la proteína relacionada con la autofagia LC3B-I y la detección de GSH y caspasa 3/7 se evaluaron mediante tinción por fluorescencia. Los niveles de MMP-2 se midieron utilizando un kit Milliplex MAP. La incubación con muestras impresas en 3D a base de MA redujo significativamente la viabilidad, en un 16% y un 28% respecto al control después de 2 y 24 horas, respectivamente. Hubo una disminución del 25% y del 55% en el nivel de GSH respecto al control después de 24 horas de incubación con las muestras fresadas CAD/CAM y las impresas en 3D, respectivamente. Además, se obtuvieron niveles más altos de LC3B-I y MMP-2 después de 24 horas de incubación con las muestras 3D a base de MA en comparación con las fresadas CAD/CAM. Por lo tanto, nuestros resultados indican que las muestras fresadas a base de MA-CAD/CAM mostraron buena biocompatibilidad durante la exposición de 24 horas, mientras que las resinas MA-3D son adecuadas para un uso a corto plazo (menos de 24 horas).