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Perspectivas sobre la Ontogénesis Temprana: Extracción de ARN, Validación de Genes de Mantenimiento y Expresión Transcripcional de Importantes Genes de Células Germinales Primordiales y de Determinación del Sexo

Autores: Bhat, Irfan Ahmad; Dubiel, Milena Malgorzata; Rodriguez, Eduardo; Jónsson, Zophonías Oddur

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2023

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Acceso abierto

Artículo científico
2023

Perspectivas sobre la Ontogénesis Temprana: Extracción de ARN, Validación de Genes de Mantenimiento y Expresión Transcripcional de Importantes Genes de Células Germinales Primordiales y de Determinación del Sexo


Categoría

Ciencias Agrícolas y Biológicas

Subcategoría

Zootecnia

Palabras clave

Investigación
Transcriptoma
Embriones de salmónidos
Patrón de expresión de ARNm
PGC
Genes SD

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 9

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
El desafío de extraer ARN de alta calidad impide la investigación del transcriptoma de los embriones de salmónidos en desarrollo. Además, el patrón de expresión de ARNm de importantes genes PGC y SD durante el desarrollo embrionario inicial aún no ha sido estudiado. Por lo tanto, en el presente estudio, nuestro objetivo fue aislar ARN de alta calidad de los huevos y embriones en desarrollo para verificar la expresión de genes mediante qPCR. Adicionalmente, se validaron cuatro HKGs para seleccionar el mejor control interno para qPCR. Se extrajo ARN de alta calidad, lo cual fue confirmado por espectrofotometría, electroforesis en gel de agarosa y análisis de Agilent TapeStation. Se eligió un gen de referencia porque mostró menor variación intra e inter-muestra. Los transcritos se expresaron en todas las etapas de desarrollo, mientras que otro se expresó solo hasta 40 grados Celsius. Otro se expresó en etapas posteriores y se mantuvo en su punto máximo por un período más corto, mientras que otro mostró un patrón irregular de expresión de ARNm. Se observó que los niveles de expresión de ARNm de los genes SD estaban regulados al alza durante las etapas posteriores del desarrollo, antes de la eclosión. Este estudio presenta una metodología sencilla para aislar ARN de alta calidad de huevos de salmón, y los perfiles de transcripción resultantes de genes PGC y SD significativos podrían ayudar a mejorar nuestra comprensión del desarrollo reproductivo en esta especie de importancia comercial.

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