Este estudio investigó los efectos de MitoQ y la proteína antifreez III (AFP III) en el semen congelado y descongelado de perros. Las muestras se mezclaron con soluciones que contenían MitoQ (200 nM/mL) y AFP III (0.75, 1.0 y 2.0 ug/mL). Después de la descongelación, observamos mejoras significativas en el movimiento y la estructura de los espermatozoides con AFP III y MitoQ. AFP III también mejoró la viabilidad de los espermatozoides y la integridad de la membrana, especialmente en las concentraciones de 0.75 y 1.0 ug/mL. No hubo cambios significativos en los niveles de ROS-HO o en la función mitocondrial, excepto en el grupo de AFP III a 1.0 ug/mL. El tratamiento combinado con MitoQ y AFP III redujo significativamente las células de esperma muertas. En conclusión, AFP III y MitoQ pueden proteger el esperma canino del daño por congelación.