(1) Antecedentes: Algunas rizobias, como CIAT 899, activan genes de nodulación cuando se cultivan bajo estrés osmótico. Este trabajo tiene como objetivo determinar si este fenómeno también ocurre en HH103. (2) Métodos: HH103 se cultivó con y sin 400 mM de manitol. Se realizaron ensayos de beta-galactosidasa, extracción de factores de nodulación, purificación e identificación por espectrometría de masas, transcriptómica mediante secuenciación de ARN, ensayos de motilidad, análisis de lactonas acilo-homoserinas y cuantificación de ácido indolacético. (3) Resultados: El estrés osmótico no iónico indujo la producción de factores de nodulación. Se detectaron cuarenta y dos factores diferentes, en comparación con 14 encontrados en ausencia de manitol. La transcriptómica indicó que cientos de genes fueron activados o reprimidos ante el estrés osmótico no iónico. La presencia de 400 mM de manitol indujo la producción de ácido indolacético y lactonas acilo-homoserinas, abolió la natación y promovió la motilidad en superficie. (4) Conclusiones: En este trabajo, mostramos que el estrés no iónico en HH103, causado por el crecimiento en presencia de 400 mM de manitol, provoca cambios notables no solo en la expresión génica, sino también en varios rasgos bacterianos, incluida la producción de factores de nodulación y otras señales simbióticas.