El balance energético negativo (BEN) en el posparto es perjudicial para las vacas y disminuye la rentabilidad en la producción de leche. Los dos orígenes de los ácidos grasos de la leche (AG), sintetizados de novo en la glándula mamaria y los lípidos plasmáticos que inicialmente provienen de la alimentación, los microbios del rumen y el tejido adiposo del animal, hacen que los AG de la leche sean candidatos como posibles biomarcadores de BEN. El objetivo de este estudio fue evaluar la posibilidad de predecir el balance energético (BE) en vacas durante los primeros 150 días de lactancia con el estado corporal (EC), las características de la leche y los AG individuales seleccionados, así como las proporciones de AG derivados de la sangre y sintetizados de novo. El BE diario de las vacas Holstein de Estonia (N = 30) se calculó en función de los pesos corporales y los valores de EC. Los AG de la leche se analizaron mediante cromatografía de gases. El análisis de partición de varianza reveló que las características de producción de leche, el EC al parto, las proporciones de AG y los días en leche explicaron el 67.1% de la varianza del BE. El análisis de bosque aleatorio indicó el mayor impacto de las proporciones C18:1cis9/C12:0+C14:0, C18:1cis9+C18:0/C12:0+C14:0, C18:1cis9/C14:0, C18:1cis9+C18:0/C14:0, C18:1cis9/suma C5:0 a C14:0, C18:1cis9+C18:0/suma C5:0 a C14:0 o C18:1cis9/C15:0. Los AG y sus proporciones por sí solos explicaron el 63.6% de la varianza del BE, lo que indica la posibilidad de utilizar los AG de la leche y sus proporciones como únicos predictores del estado energético en vacas lecheras.