El estrés por sequía afecta significativamente el crecimiento y la productividad de las plantas. Las estrigolactonas (SLs), una clase de hormonas vegetales derivadas de los carotenoides, son reconocidas por su papel fundamental en la modulación de la morfología de las plantas y en la mejora de la resistencia a la sequía. Sin embargo, los mecanismos subyacentes a través de los cuales las SLs influyen en la tolerancia a la sequía en la festuca alta permanecen en gran medida sin explorar. En este estudio, empleamos TIS108 para inhibir la biosíntesis de SL bajo condiciones de sequía y evaluamos una serie de parámetros morfológicos y fisiológicos en la festuca alta, incluyendo la biomasa tanto por encima como por debajo del suelo, las actividades antioxidantes, los contenidos de prolina y azúcares solubles, y las tasas de supervivencia, a lo largo de tratamientos de sequía y sequía combinada con la inhibición de TIS108. Nuestros hallazgos demuestran que la supresión de la síntesis de SL afecta negativamente la resistencia a la sequía de la festuca alta. A través de la secuenciación exhaustiva del transcriptoma y análisis posteriores de qRT-PCR de muestras sometidas a sequía con y sin tratamiento de TIS108, identificamos una marcada disminución de genes involucrados en el metabolismo de auxinas y en el desarrollo de raíces. Esta disminución se correlacionó con reducciones significativas en la longitud total de las raíces, el área superficial de las raíces y el número de puntas de raíces bajo condiciones de estrés por sequía. En conjunto, nuestra investigación aclara que la inhibición de la síntesis de SL perjudica la tolerancia a la sequía en la festuca alta al limitar el crecimiento y desarrollo de las raíces, mediado a través de la modulación del metabolismo de auxinas.