Establecimiento de un ensayo de PCR en tiempo real para la detección de en lagartos
Autores: Brockmann, Maria; Leineweber, Christoph; Hellebuyck, Tom; Martel, An; Pasmans, Frank; Gentil, Michaela; Müller, Elisabeth; Marschang, Rachel E.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Establecimiento de un ensayo de PCR en tiempo real para la detección de en lagartos
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Causa potencial
Dermatitis
Queilitis
Ensayo de PCR en tiempo real
Gen 16S rRNA
Especies bacterianas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
(1) Antecedentes: () es una posible causa de dermatitis y queilitis en lagartos. El objetivo de este estudio fue establecer un ensayo de PCR en tiempo real para la detección de . (2) Métodos: Se seleccionaron cebadores y una sonda dirigidos al gen 16S rRNA, utilizando secuencias de genes 16S rRNA de así como de otras especies bacterianas derivadas de GenBank. El ensayo de PCR se probó con 14 controles positivos de diferentes cultivos, así como con 34 controles negativos de varios cultivos no bacterianos. Además, se probaron muestras de 38 lagartos, principalmente spp. y spp., enviadas a un laboratorio veterinario comercial para detectar la presencia de utilizando el protocolo establecido. (3) Resultados: Se pudieron detectar concentraciones tan bajas como 2 x 10 colonias por mL utilizando diluciones de cultivo celular bacteriano (correspondientes a aproximadamente 200 UFC por PCR). El ensayo resultó en un porcentaje intraensayo de coeficiente de variación (CV) del 1.31% y un CV interensayo del 1.80%. (4) Conclusiones: El ensayo presentado es capaz de detectar en muestras clínicas, disminuyendo el tiempo de respuesta del laboratorio en comparación con los métodos de detección convencionales basados en cultivos.
Descripción
(1) Antecedentes: () es una posible causa de dermatitis y queilitis en lagartos. El objetivo de este estudio fue establecer un ensayo de PCR en tiempo real para la detección de . (2) Métodos: Se seleccionaron cebadores y una sonda dirigidos al gen 16S rRNA, utilizando secuencias de genes 16S rRNA de así como de otras especies bacterianas derivadas de GenBank. El ensayo de PCR se probó con 14 controles positivos de diferentes cultivos, así como con 34 controles negativos de varios cultivos no bacterianos. Además, se probaron muestras de 38 lagartos, principalmente spp. y spp., enviadas a un laboratorio veterinario comercial para detectar la presencia de utilizando el protocolo establecido. (3) Resultados: Se pudieron detectar concentraciones tan bajas como 2 x 10 colonias por mL utilizando diluciones de cultivo celular bacteriano (correspondientes a aproximadamente 200 UFC por PCR). El ensayo resultó en un porcentaje intraensayo de coeficiente de variación (CV) del 1.31% y un CV interensayo del 1.80%. (4) Conclusiones: El ensayo presentado es capaz de detectar en muestras clínicas, disminuyendo el tiempo de respuesta del laboratorio en comparación con los métodos de detección convencionales basados en cultivos.