Este estudio tuvo como objetivo investigar la recuperación de ocho quesos portugueses elaborados con leche cruda de oveja, en relación con la resistencia a antibióticos, genes de virulencia, concentración mínima inhibitoria (CMI) de cloruro de benzalconio (BAC), capacidad de formación de biopelículas y erradicación de biopelículas (MBEC) por BAC. Se evaluó la resistencia antimicrobiana contra siete antibióticos de cinco grupos utilizando el método de difusión en disco. La presencia de los genes que codifican resistencia a los antibióticos penicilina, eritromicina, vancomicina, aminoglucósido y beta-lactámico, así como los genes que codifican factores de virulencia, se investigó mediante PCR multiplex. La susceptibilidad de las células planctónicas a BAC se evaluó mediante los valores de CMI y CMB de los aislados, utilizando el método de microdilución en caldo. Para evaluar la capacidad de formación de biopelículas y la resistencia de las biopelículas a BAC, se produjeron biopelículas en cupones de acero inoxidable, seguidas de la exposición a BAC. Los resultados mostraron una alta resistencia a los antibióticos vancomicina (87.5%), eritromicina (75%), tetraciclina (50%) y penicilina (37.5%). Se observó resistencia a múltiples fármacos en el 68.8% de los aislados. Se detectaron genes que codifican los factores de virulencia FrsB y gelatinas E en todos los aislados. Los genes y se encontraron en el 56.3% y 37.5% de los aislados, respectivamente. Todos los aislados exhibieron una capacidad de formación de biopelículas, independientemente del tiempo y la temperatura de incubación probados. Sin embargo, después de 72 h a 37 grados C, las biopelículas mostraron diferencias significativas.