Los métodos existentes de cuantificación de calosa incluyen la microscopía de epifluorescencia y la espectrofotometría de fluorescencia de partículas de calosa teñidas con azul de anilina, la microscopía de inmunofluorescencia y la evaluación indirecta de las actividades enzimáticas de la calosa sintasa y la beta-(1,3)-glucanasa. Algunos de estos métodos son laboriosos, consumen mucho tiempo, no son específicos de la calosa, están sesgados y requieren altas habilidades técnicas. Aquí, describimos un método de cuantificación de calosa basado en un Ensayo Inmunoenzimático de tipo Sándwich (S-ELISA). Los brotes de banana derivados de cultivos de tejidos fueron inoculados con la bacteria pv. () como un factor de estrés biótico que induce la producción de calosa. Se recolectaron muestras de tejido de hojas, pseudotallos y cormos de banana a los 14 días post-inoculación (dpi) para la cuantificación de calosa. Los niveles de calosa fueron significativamente diferentes en los tejidos de banana de los grupos inoculados y de control, excepto en los pseudotallos de ambos genotipos de banana. El método descrito aquí podría aplicarse para la cuantificación de calosa en diferentes especies de plantas con un nivel satisfactorio de especificidad para la calosa y reproducibilidad. Además, el uso de placas de 96 pocillos hace que este método sea adecuado para estudios de cuantificación de calosa de alto rendimiento con un muestreo mínimo y sesgos de análisis. Proporcionamos descripciones detalladas paso a paso del método.