Ensayo de Ames Transferido de la Placa de Microtitulación al Formato de Ensayo Planar
Autores: Schmidtmann, Katharina; Lemme, Johanna; Morlock, Gertrud E.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Ensayo de Ames Transferido de la Placa de Microtitulación al Formato de Ensayo Planar
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Ingeniería Química
Palabras clave
Agencia internacional
Mutagenicidad
Ensayo de Ames
Ensayo planar
Compuestos mutagénicos
Mezclas complejas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 35
Citaciones: Sin citaciones
La Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer ha estudiado y clasificado 1045 sustancias potenciales. Por lo tanto, es importante desarrollar métodos de cribado rápido para identificar la mutagenicidad de los compuestos y, más adelante, la intensidad y el número de sustancias mutagénicas individuales en mezclas de muestras complejas. El ensayo in vitro de Ames actual en formato de placa de microtitulación (MPF) utiliza una detección sensible al pH como punto final; sin embargo, las sustancias ácidas en mezclas complejas pueden interferir en el resultado de mutagenicidad. Por lo tanto, se trasladó al formato de ensayo planar para ser más selectivo en las pruebas de mezclas complejas. La co-cultura de las cepas de Typhimurium TA98 y TA100 con una densidad óptica de 0.4 a 600 nm se aplicó en un cromatograma de gel de sílice de capa delgada de alto rendimiento y se incubó en superficie durante 5 horas, período que se limitó debido a la difusión de la zona. Se probaron varios controles positivos, y se estableció el óxido de 4-nitroquinolina con un límite de detección de 100 ng como control positivo. Sin embargo, debido al tiempo de incubación más corto, no se detectaron ni diferenciaron compuestos mutagénicos en los perfumes, tés de hierbas, margarinas y cremas de manos probados. Esto no significa que las muestras estén libres de mutágenos, pero sugiere que se necesitan urgentemente más mejoras en el bioensayo para aumentar la sensibilidad y selectividad de la respuesta. En comparación con los ensayos de valor total convencionales, un ensayo de Ames planar realizado sobre los componentes de muestra separados y adsorbidos avanza la investigación en toxicología porque los compuestos mutagénicos se separan de las moléculas interferentes debido a la separación integrada. Así, proporcionaría una detección más selectiva de mutágenos en mezclas complejas y permitiría la prueba de grandes volúmenes de muestra o muestras concentradas sin interferencia de matriz.
Descripción
La Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer ha estudiado y clasificado 1045 sustancias potenciales. Por lo tanto, es importante desarrollar métodos de cribado rápido para identificar la mutagenicidad de los compuestos y, más adelante, la intensidad y el número de sustancias mutagénicas individuales en mezclas de muestras complejas. El ensayo in vitro de Ames actual en formato de placa de microtitulación (MPF) utiliza una detección sensible al pH como punto final; sin embargo, las sustancias ácidas en mezclas complejas pueden interferir en el resultado de mutagenicidad. Por lo tanto, se trasladó al formato de ensayo planar para ser más selectivo en las pruebas de mezclas complejas. La co-cultura de las cepas de Typhimurium TA98 y TA100 con una densidad óptica de 0.4 a 600 nm se aplicó en un cromatograma de gel de sílice de capa delgada de alto rendimiento y se incubó en superficie durante 5 horas, período que se limitó debido a la difusión de la zona. Se probaron varios controles positivos, y se estableció el óxido de 4-nitroquinolina con un límite de detección de 100 ng como control positivo. Sin embargo, debido al tiempo de incubación más corto, no se detectaron ni diferenciaron compuestos mutagénicos en los perfumes, tés de hierbas, margarinas y cremas de manos probados. Esto no significa que las muestras estén libres de mutágenos, pero sugiere que se necesitan urgentemente más mejoras en el bioensayo para aumentar la sensibilidad y selectividad de la respuesta. En comparación con los ensayos de valor total convencionales, un ensayo de Ames planar realizado sobre los componentes de muestra separados y adsorbidos avanza la investigación en toxicología porque los compuestos mutagénicos se separan de las moléculas interferentes debido a la separación integrada. Así, proporcionaría una detección más selectiva de mutágenos en mezclas complejas y permitiría la prueba de grandes volúmenes de muestra o muestras concentradas sin interferencia de matriz.