Nuestra investigación previa ha demostrado el papel de las temperaturas óptimas y las especies reactivas de oxígeno (ERO) en el mantenimiento de la resistencia sin síntomas (RS) no huésped de la cebada a los oídios. Sin embargo, las funciones exactas de la temperatura y las ERO en la RS de las plantas, incluida la cebada, frente a infecciones virales no se conocen. Aunque la cebada es un no huésped para el (TMV), este virus puede replicarse en las hojas de cebada a temperaturas de aproximadamente 30 grados C. Aquí elucidamos la influencia de los tratamientos de preacondicionamiento por estrés térmico a corto plazo (30 grados C, 3 h; choque térmico a 49 grados C, 20 s) en la RS sin síntomas de la cebada frente al TMV y el papel de la ERO superóxido (O) en el mantenimiento de la RS. El estrés térmico y los tratamientos antioxidantes (superóxido dismutasa y catalasa, SOD + CAT) resultaron en niveles de TMV de 50-100% más altos, mientras que la aplicación combinada de choque térmico y SOD + CAT causó aumentos adicionales en el TMV y la aparición de muerte celular y de tejidos que se asemejaba a una respuesta hipersensible (RH). Un aumento temprano (a partir de 2 h después de la inoculación) de O estuvo esencialmente ausente en la cebada infectada por TMV expuesta a tratamientos de preacondicionamiento por estrés térmico a corto plazo. La expresión de los genes de cebada que regulan el metabolismo de ERO (O) y la muerte celular mostró una correlación inversa con los niveles de TMV incluso en puntos de tiempo posteriores (1-4 días después de la inoculación), lo que implica un papel en la RS sin síntomas, mientras que los niveles aumentados del antioxidante glutatión marcaron la supresión inducida por estrés térmico de la RS. Demostramos que el estrés térmico a corto plazo y los tratamientos antioxidantes resultan en una RS comprometida de la cebada frente al TMV, señalando el papel de las temperaturas óptimas y las ERO (O) en la RS sin síntomas frente a infecciones virales.