La pudrición de la espiga por Fusarium (FHB) es una de las principales enfermedades del trigo causada por especies de Fusarium (principalmente y ), lo que resulta en pérdidas significativas de rendimiento de trigo a nivel mundial y riesgos para la seguridad alimentaria. La cría de variedades de trigo con genes de resistencia es la estrategia más ecológica y económica para controlar el FHB. Keng ex P. C. Kuo (2 = 2 = 14, NsNs), que mostró tolerancia abiótica y resistencia biótica, tiene un valor de investigación significativo y potencial como un importante recurso genético para la mejora del trigo. En estudios anteriores, cruzamos con trigo común y desarrollamos líneas de trigo que contenían diferentes cromosomas N. En este estudio, identificamos una línea adicional 4N, DA26, de las progenies de líneas derivadas de trigo utilizando hibridación in situ genómica (GISH) y análisis de hibridación in situ por fluorescencia (FISH). La línea DA26 mostró alta resistencia a la pudrición de la espiga por Fusarium (FHB) en condiciones de invernadero y de campo. Sin embargo, las líneas parentales de trigo común, Chinese Spring (CS) y el mutante CS, mostraron alta susceptibilidad al FHB. Una evaluación de campo de los rasgos agronómicos mostró que la altura de la planta de DA26 era significativamente menor que la de CS, mientras que no hubo diferencias significativas en los otros rasgos agronómicos. Además, también desarrollamos ocho cebadores específicos para 4Ns para identificar el cromosoma 4Ns, lo que puede facilitar la cría de trigo y el mapeo de genes de resistencia al FHB en el futuro.