La nefropatía diabética es una complicación importante en pacientes diabéticos. Los podocitos sufren pérdida y desprendimiento de la membrana basal. La comunicación intra- e intercelular a través de exosomas son procesos clave para mantener la función, y el sistema Rab3A/Rab27A es un contraparte importante. Anteriormente, observamos cambios significativos en el sistema Rab3A/Rab27A en podocitos bajo sobrecarga de glucosa, demostrando su importante papel en la lesión de podocitos. Investigamos la implicación del silenciamiento del sistema Rab3A/Rab27A en podocitos tratados con alta glucosa y analizamos el efecto en la diferenciación, apoptosis, organización del citoesqueleto, distribución de vesículas y expresión de microARN en células y exosomas. Para esto, sometimos a los podocitos a alta glucosa y transfección a través de siARN, y aislamos vesículas extracelulares y realizamos ensayos de western blot, microscopía electrónica de transmisión, RT-qPCR, inmunofluorescencia y citometría de flujo. Encontramos que el silenciamiento generalmente conduce a una disminución en la diferenciación de podocitos y organización del citoesqueleto y un aumento en la apoptosis. Además, las vesículas positivas para CD63 experimentaron un cambio en el patrón de distribución. Bajo alta glucosa, el silenciamiento de Rab3A/Rab27A mejora algunos de estos procesos perjudiciales, sugiriendo una influencia diferencial dependiendo de la presencia o ausencia de estrés celular. También observamos cambios sustanciales en la expresión de miARN que eran relevantes en la nefropatía diabética tras el silenciamiento y el tratamiento con glucosa. Nuestros hallazgos destacan el sistema Rab3A/Rab27A como un participante clave en la lesión de podocitos y la regulación del tráfico vesicular en la nefropatía diabética.