La criopreservación genera una cantidad sustancial de ROS en el semen, lo que lleva a una disminución en la calidad del esperma y la capacidad de fertilización. El objetivo de este estudio fue investigar los efectos del resveratrol y su concentración óptima en la calidad del esperma de carnero después de la criopreservación. El semen de carnero se diluyó con un medio de congelación que contenía diferentes concentraciones de resveratrol (0, 25, 50, 75 y 100 M). Después de la descongelación, se evaluaron varios parámetros espermáticos como la motilidad total, la motilidad progresiva, la integridad del acrosoma, la integridad de la membrana plasmática, el potencial de la membrana mitocondrial, el contenido de glutatión (GSH), la actividad de la glutatión sintetasa (GPx), la actividad de la superóxido dismutasa (SOD), la actividad de la catalasa (CAT), el contenido de peroxidación lipídica (LPO), el contenido de malondialdehído (MDA), el nivel de ROS, el nivel de SIRT1, el daño oxidativo del ADN y el nivel de fosforilación de AMPK. Además, se evaluó la apoptosis del esperma post-descongelación. Comparativamente, la adición de resveratrol hasta 75 M mejoró significativamente la motilidad del esperma y los parámetros espermáticos del esperma de carnero criopreservado. Específicamente, 50 M de resveratrol demostró una notable mejora en la integridad del acrosoma y de la membrana plasmática, la capacidad antioxidante, el potencial de la membrana mitocondrial, el contenido de trifosfato de adenosina (ATP), el nivel de SIRT1 y los niveles de fosforilación de AMPK en comparación con el grupo de control (< 0.05). También redujo significativamente (< 0.05) el daño oxidativo al ADN del esperma. Sin embargo, se observaron efectos perjudiciales del resveratrol a una concentración de 100 M de resveratrol. En conclusión, la adición de 50 M de resveratrol a la solución de criopreservación es óptima para mejorar la calidad del esperma de carnero criopreservado.