Las familias de factores de transcripción de estrés térmico (Hsf) juegan roles importantes en las respuestas al estrés abiótico. Sin embargo, estudios previos informaron que los genes pueden desempeñar roles diversos en respuesta al estrés térmico. Aquí, realizamos un análisis funcional de un gen Hsf de Clase B de fresa silvestre, para mejorar la termotolerancia. La estructura de FvHsfB1a contiene un dominio Hsf típico para la unión al ADN en el N-terminal, y FvHsfB1a pertenece a la familia B1 de Hsfs. La proteína FvHsfB1a se localizó en el núcleo. El gen se expresó en varios tejidos de fresa y se indujo altamente por tratamiento térmico. En condiciones de estrés térmico, la expresión ectópica de mejora la termotolerancia, con tasas de germinación y supervivencia más altas, una longitud de raíz primaria más larga, mayores contenidos de prolina y clorofila, menores contenidos de malondialdehído (MDA) y O, mejores actividades enzimáticas y mayor expresión de genes relacionados con la respuesta al calor y al estrés en comparación con WT. FvWRKY75 activa el promotor del gen al reconocer el elemento W-box. De manera similar, las líneas -OE también mostraron un fenotipo tolerante al calor, exhibiendo más contenidos de prolina y clorofila, menores contenidos de MDA y O, y mayores actividades enzimáticas bajo estrés térmico. En conjunto, nuestro estudio indica que es un regulador positivo del estrés térmico.