Mejorar la tolerancia a la sequía en las plantas es esencial para aumentar los rendimientos de los cultivos en condiciones de escasez de agua. En este estudio, investigamos el papel funcional del gen de maíz ZmDST44, que es objetivo del miARN. Nuestros resultados indican que regula ZmDST44 al cortar su ARNm, como se confirmó mediante patrones de expresión inversos y análisis de 5-RACE. La sobreexpresión de ZmDST44 en Arabidopsis, arroz y maíz resultó en mejoras significativas en la tolerancia a la sequía. Las plantas transgénicas mostraron niveles reducidos de malondialdehído (MDA), aumento en la acumulación de prolina y regulación al alza de genes responsables de la sequía en comparación con las plantas de tipo salvaje. Las plantas transgénicas y el arroz mostraron una mejor resistencia a la sequía y tasas de recuperación post-sequía más altas, y el maíz transgénico mostró una menor sensibilidad al estrés por sequía. Estos hallazgos sugieren que ZmDST44 actúa como un regulador positivo de la tolerancia a la sequía en diferentes especies de plantas y tiene potencial para desarrollar cultivos resistentes a la sequía a través de la ingeniería genética.