El desarrollo de un procedimiento para la criopreservación del callo mediante vitrificación
Autores: Zhang, Yiying; Deng, Shan; Lin, Huifeng; Chu, Yunxia; Huang, Jingyan; Li, Shouguo; Lin, Fazhuang; Zhang, Sumei; Jiang, Weilan; Ren, Li; Chen, Hairong
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
El desarrollo de un procedimiento para la criopreservación del callo mediante vitrificación
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Criopreservación
Recursos de germoplasma
Vitrificación
Callo
Precultivo
Deshidratación
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 12
Citaciones: Sin citaciones
La criopreservación de recursos de germoplasma es extremadamente importante para la producción y selección de nuevas variedades. En la actualidad, el procedimiento de criopreservación para el callo no ha sido establecido. En este estudio, se utilizaron las hojas como explantes para cultivar el callo. El procedimiento de criopreservación del callo mediante vitrificación fue inicialmente establecido utilizando el método experimental ortogonal de cuatro factores y tres niveles en los pasos de precultivo, carga y deshidratación. Además, la criopreservación basada en vitrificación fue optimizada al cambiar la temperatura de precultivo y la solución de carga, y al añadir sustancias exógenas a la solución de vitrificación de plantas (PVS2). En este procedimiento, el callo fue precultivado a 25 grados C durante 2 días, y cargado en 50% PVS2 a 25 grados C durante 60 minutos. El callo fue deshidratado con PVS2 que contenía 0.08 mM de glutatión reducido (GSH) a 0 grados C durante 60 minutos. Después de un enfriamiento rápido en nitrógeno líquido durante 1 hora, fue calentado rápidamente en un baño de agua a 40 grados C durante 90 segundos y descargado durante 30 minutos. Después de 1 día de recuperación, la tasa de supervivencia celular relativa del callo criopreservado fue del 64.60%. Los resultados proporcionan un método básico y efectivo valioso para la conservación a largo plazo de recursos de germoplasma.
Descripción
La criopreservación de recursos de germoplasma es extremadamente importante para la producción y selección de nuevas variedades. En la actualidad, el procedimiento de criopreservación para el callo no ha sido establecido. En este estudio, se utilizaron las hojas como explantes para cultivar el callo. El procedimiento de criopreservación del callo mediante vitrificación fue inicialmente establecido utilizando el método experimental ortogonal de cuatro factores y tres niveles en los pasos de precultivo, carga y deshidratación. Además, la criopreservación basada en vitrificación fue optimizada al cambiar la temperatura de precultivo y la solución de carga, y al añadir sustancias exógenas a la solución de vitrificación de plantas (PVS2). En este procedimiento, el callo fue precultivado a 25 grados C durante 2 días, y cargado en 50% PVS2 a 25 grados C durante 60 minutos. El callo fue deshidratado con PVS2 que contenía 0.08 mM de glutatión reducido (GSH) a 0 grados C durante 60 minutos. Después de un enfriamiento rápido en nitrógeno líquido durante 1 hora, fue calentado rápidamente en un baño de agua a 40 grados C durante 90 segundos y descargado durante 30 minutos. Después de 1 día de recuperación, la tasa de supervivencia celular relativa del callo criopreservado fue del 64.60%. Los resultados proporcionan un método básico y efectivo valioso para la conservación a largo plazo de recursos de germoplasma.