Las enmiendas del suelo como la piedra caliza y el yeso pueden influir en la eficiencia de uso del carbono microbiano (CUE) al alterar la estequiometría de nutrientes, especialmente nitrógeno (N) y fósforo (P). Sin embargo, sus efectos más allá de la capa superficial, especialmente en sistemas de siembra directa, permanecen poco claros. Este estudio evaluó el CUE microbiano a través de la eficiencia de uso del sustrato (SUE) siguiendo la adición de glucosa como un factor que influye en el potencial de secuestro de carbono (C). Dos experimentos se llevaron a cabo en suelo tropical. El primero evaluó la adición de C-glucosa (G) a suelo tratado con cal, cal + yeso y un control, con o sin la adición de N. El segundo comparó tratamientos de piedra caliza + yeso y control, incorporando G con N y P. La respiración microbiana del suelo (emisión de CO) se midió después de 14 y 42 días. En el suelo superficial (0-10 cm), el CUE aumentó con la piedra caliza o la piedra caliza + yeso cuando se aplicó N. En el subsuelo (40-60 cm), estas enmiendas mejoraron el CUE en comparación con el suelo no tratado en ausencia de N. Los tratamientos con G+N+P o G+P mejoraron el CUE en el suelo superficial. Al mismo tiempo, G+N+P aumentó el CUE en el subsuelo independientemente de la corrección de acidez. Las diferencias en la evolución de CO indicaron un mayor CUE microbiano con la corrección de acidez. Las aplicaciones equilibradas de N y P mejoraron significativamente el CUE, resaltando la importancia tanto de la corrección de acidez del suelo como de la disponibilidad de nutrientes para el procesamiento de carbono microbiano.