Se utilizaron diferentes niveles de energía metabolizable (EM) y la inclusión de ácido guanidinoacético (GAA) en la dieta de gallinas Lohmann LSL-CLASSIC de 53 semanas para evaluar su efecto en parámetros reproductivos, calidad del huevo, morfología intestinal y la respuesta inmune. Se utilizaron seis dietas en un diseño factorial 3 x 2, con tres niveles de EM (2850, 2800 y 2750 kcal/kg), y con (0.08%) o sin la inclusión de GAA. La adición de GAA a dietas con bajos niveles de EM aumentó (< 0.05) la producción de huevos y la masa de huevos. Además, las gallinas alimentadas con 2800 kcal/g sin GAA tuvieron la mayor concentración (< 0.05) de interleucina IL-2 en suero, mientras que aquellas alimentadas con dietas con la misma cantidad de EM pero suplementadas con 0.08% de GAA tuvieron la menor concentración. Finalmente, la inclusión de 0.08% de GAA aumentó (< 0.05) la concentración de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), independientemente del nivel de EM en la dieta. Este estudio destaca el papel potencial del GAA en la disminución del nivel de energía de EM (50-100 kcal/g) en la alimentación de gallinas y en la modulación de respuestas inmunitarias específicas. Se recomienda realizar más investigaciones para comprender completamente los mecanismos de acción del GAA sobre el mecanismo objetivo de la rapamicina y su relación con la respuesta inmune.