El hígado de las gallinas es esencial para mantener las actividades fisiológicas y la homeostasis. Este estudio tiene como objetivo investigar la función específica y el mecanismo regulador molecular del microARN-122 (miR-122), que se expresa en alta cantidad en el hígado de las gallinas. Se construyó un vector de sobreexpresión mediado por lentivirus de miR-122 y se utilizó para infectar gallinas hembra de la raza Qingyuan Partridge de 12 días de edad. Se realizó un análisis de secuenciación del transcriptoma para identificar genes expresados diferencialmente en el hígado. La sobreexpresión de miR-122 resultó en 776 genes expresados diferencialmente (DEGs). Los análisis de enriquecimiento, incluyendo Gene Ontology (GO), la Enciclopedia de Kyoto de Genes y Genomas (KEGG) y el Análisis de Enriquecimiento de Conjuntos de Genes (GSEA) revelaron asociaciones con el metabolismo de lípidos, la senescencia celular, las moléculas de adhesión celular y la vía de señalización MAPK. Se identificaron ocho genes diana potenciales de miR-122 a través de plataformas de predicción de objetivos de miARN e integración de literatura. Este estudio proporciona nuevas perspectivas sobre los mecanismos reguladores moleculares de miR-122 en el hígado de las gallinas, destacando su papel en procesos biológicos clave y vías de señalización. Estos descubrimientos mejoran nuestra comprensión del impacto de miR-122 en la función del hígado de las gallinas y ofrecen información valiosa para mejorar el rendimiento y la salud en la producción avícola.