Este estudio evalúa los efectos de la cafeína (CAF) en las bacterias, la microalga, la macrófita y las larvas, con el objetivo de comprender su impacto ambiental y su contribución a la evaluación del riesgo ecológico. Se observaron inhibiciones de bioluminiscencia en (EC = 998.5 mg/L) e inhibiciones del crecimiento en y (EC = 60.1 mg/L y EC = 649.2 mg/L, respectivamente). Para, se registraron reducciones en la actividad de catalasa (CAT) y respuestas no lineales en las glutatión S-transferasas (GSTs). No se observaron cambios significativos en los contenidos de prolina, malondialdehído (MDA) y pigmentos. En, se observó mortalidad aguda (LC = 644.5 mg/L) y el crecimiento se vio significativamente afectado después de 10 días de exposición a CAF (EC = 81.62 mg/L para biomasa fresca). Después de 10 días de exposición, hubo un aumento en la actividad de CAT y en las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico, con niveles de TBARS tanto en concentraciones >=82.64 mg/L, y una disminución en GSTs (92.18 mg/L) y acetilcolinesterasa (AChE).