(1) Antecedentes: La nanocelulosa es un nanomaterial innovador con un enorme potencial para su uso en una amplia variedad de aplicaciones industriales y biomédicas, y con un valor económico en rápido crecimiento. La creciente producción de nanocelulosa está llevando a una mayor exposición humana, lo que genera preocupaciones sobre sus posibles efectos en la salud. Este estudio tuvo como objetivo evaluar los posibles efectos tóxicos y genotóxicos de diferentes nanocelulosas en dos líneas celulares de mamíferos; (2) Métodos: Se probaron dos micro/nanocelulosas, producidas con un tratamiento previo de oxidación TEMPO (CNFs) y un tratamiento enzimático (CMFs), y cristales nanocelulósicos (CNCs) en células humanas similares a osteoblastos (MG-63) y fibroblastos de pulmón de hámster chino (V79) utilizando los ensayos MTT y clonogénicos para analizar la citotoxicidad, y el ensayo de micronúcleos para probar la genotoxicidad; (3) Resultados: se observó citotoxicidad mediante el ensayo clonogénico en células V79, particularmente para los CNCs, pero no mediante el ensayo MTT; CNF indujo micronúcleos en ambas líneas celulares y puentes nucleoplasmáticos en células MG-63; CMF y CNC indujeron micronúcleos y puentes nucleoplasmáticos en células MG-63, pero no en células V79; (4) Conclusiones: Todas las nanocelulosas revelaron citotoxicidad y genotoxicidad, aunque a diferentes concentraciones, lo que puede estar relacionado con sus diferencias fisicoquímicas y disponibilidad para la captación celular, y con diferencias en la respuesta al daño del ADN del modelo celular.