La sequía es una perturbación abiótica que reduce la fotosíntesis, el crecimiento de las plantas y el rendimiento de los cultivos. Se utilizó ácido ascórbico (AsA) como agente de preacondicionamiento de semillas para ayudar al brócoli (var.) a resistir la sequía. Sin embargo, el mecanismo preciso por el cual el AsA mejora el desarrollo de las plántulas sigue siendo desconocido. Una hipótesis es que el AsA actúa a través de mecanismos antioxidantes y reduce el estrés oxidativo. Este estudio tiene como objetivo confirmar el efecto de diversas concentraciones de AsA (control, 0 ppm, 1 ppm o 10 ppm) en el crecimiento de las plántulas y los cambios en el estado antioxidante de las plántulas de brócoli bajo riego regular o estrés por sequía. El AsA aumentó la masa seca de los brotes, el área foliar, la fotosíntesis neta y la eficiencia en el uso del agua en plántulas regadas y sometidas a estrés por sequía. El AsA aumentó significativamente (< 0.001) el contenido de carotenoides en plántulas regadas y sometidas a estrés por sequía en aproximadamente un 27% y un 111%, respectivamente. La sequía aumentó la clorofila b, los flavonoides, los fenólicos, el ascorbato y la producción de peróxido de hidrógeno en plántulas de control, pero no tuvo efecto o tuvo un efecto menor en las plantas preacondicionadas con 10 ppm de AsA. No hubo mejora en la eliminación de especies reactivas de oxígeno en las plántulas preacondicionadas con AsA en comparación con el control. La ausencia o reducción de indicadores bioquímicos de estrés sugiere que las plántulas de brócoli preacondicionadas no perciben el estrés de la misma manera que las plántulas de control. En conclusión, el aumento constante en la concentración de carotenoides sugiere que los carotenoides desempeñan algún papel en la respuesta de preacondicionamiento, aunque el mecanismo exacto sigue siendo desconocido.