El consumo de brotes se ha vuelto popular debido a su amplia disponibilidad, fácil proceso de cultivo y actividad biológica comprobada. Además, factores de estrés, como el acceso limitado a la luz o la gravedad alterada durante el crecimiento, pueden contribuir a la mayor actividad y la síntesis de compuestos bioactivos. En este estudio, por primera vez, se examinó el impacto de la oscuridad y las condiciones de microgravedad simulada en los brotes de trébol blanco de la familia. Entre varias especies utilizadas en los intentos preliminares, solo el trébol blanco mostró un brote satisfactorio en las condiciones de gravedad alterada, y por lo tanto se eligió para un examen más detallado. Se utilizó un dispositivo de posicionamiento aleatorio durante el proceso de cultivo para simular condiciones de microgravedad. Además, los brotes se cultivaron en total oscuridad. La microgravedad simulada y/o la oscuridad durante los primeros días del crecimiento de los brotes causaron una reducción de biomasa, un aumento en la síntesis de compuestos bioactivos (isoflavonas y fenoles) y cambios en el nivel de ácido abscísico y fenilalanina amonio-liasa. Además, se incrementaron las propiedades antioxidantes de los brotes, mientras que el aumento de su impacto citotóxico se observó solo en células de cáncer de próstata LNCaP dependientes de andrógenos. Para concluir, los resultados presentados son prometedores en la búsqueda de nuevos candidatos a alimentos funcionales y se necesitan más estudios, dirigidos a otras familias de plantas.