Este estudio tuvo como objetivo explorar el papel regulador de la metilación del promotor en su nivel de transcripción y desentrañar el efecto sobre la proliferación y diferenciación de los mioblastos bovinos. Se realizaron reacciones en cadena de la polimerasa con bisulfito (BSP) y PCR cuantitativa en tiempo real para determinar el estado de metilación y los niveles de transcripción de la región del promotor en diferentes etapas de crecimiento. Los resultados de BSP mostraron que el nivel de metilación en el grupo de terneros bovinos (CB) fue significativamente más alto que en el grupo de bovinos adultos (AB) (< 0.05). Por otro lado, los resultados de qRT-PCR indicaron que el nivel de expresión de ARNm en el grupo AB fue significativamente más alto que en el grupo CB (< 0.05), lo que sugiere una disminución significativa en la expresión génica a altos niveles de metilación del ADN. Se aplicaron CCK-8 y citometría de flujo para determinar el efecto de silenciar el gen en la proliferación de los mioblastos bovinos. Además, se realizaron qRT-PCR y Western blot para analizar la expresión de genes asociados con la proliferación y diferenciación de los mioblastos bovinos. Los resultados de CCK-8 revelaron que el grupo de horquilla corta (sh) promovió significativamente la proliferación de mioblastos en comparación con el grupo de control negativo de horquilla corta (shNC) (< 0.05). Los resultados de citometría de flujo mostraron una disminución significativa en el número de células en fase G1 (< 0.05) y un aumento significativo en el número de células en fase S (< 0.05) en el grupo sh en comparación con el grupo shNC. Además, la expresión de genes clave para la proliferación de mioblastos (y) y diferenciación (y) se incrementó significativamente tanto a nivel de ARNm como de proteínas (< 0.05). En resumen, este estudio ha demostrado que la transcripción está regulada por la metilación en la región del promotor y que el silenciamiento promueve la proliferación y diferenciación de los mioblastos bovinos. En general, nuestros hallazgos sientan las bases para estudios futuros sobre el papel regulador de la epigenética en el desarrollo de los mioblastos bovinos.