Antecedentes: La enfermedad de cálculos biliares de colesterol (CGS) suele ir acompañada de disfunción de contracción de la vesícula biliar e inflamación crónica, pero las opciones terapéuticas efectivas siguen siendo limitadas. Este estudio investiga si un tratamiento con ultrasonido pulsado de baja intensidad (LIPUS) puede mejorar la motilidad de la vesícula biliar y aliviar la inflamación crónica al tiempo que explora los mecanismos subyacentes. Métodos: La motilidad de la vesícula biliar se evaluó a través de pruebas de contracción in vitro e in vivo, mientras que la condición de la bilis se evaluó observando el aclaramiento de los cristales de bilis. Se realizaron análisis de tejidos y Western blotting para examinar la expresión del receptor de colecistoquinina A (CCKAR) y la alfa-actina de músculo liso (alfa-SMA) como marcadores de la salud del músculo liso de la vesícula biliar y el microambiente inflamatorio. Los niveles de colesterol en sangre se midieron mediante ensayos bioquímicos. Resultados: El tratamiento con LIPUS mejoró notablemente la contractilidad de la vesícula biliar en respuesta a la estimulación con CCK-8 y aceleró el aclaramiento de los cristales de bilis. También redujo la infiltración de células inflamatorias y el edema de tejidos, y promovió la formación de nuevos capilares en la vesícula biliar, mitigando la progresión de la CGS. Además, el LIPUS restauró la expresión de CCKAR y mejoró el grosor de la capa de músculo liso de la vesícula biliar, proporcionando una base estructural para el aumento de la contractilidad del músculo liso. Conclusión: El LIPUS mejora la motilidad de la vesícula biliar y reduce la inflamación crónica en la CGS al mejorar la expresión de CCKAR y la integridad del músculo liso. Estos hallazgos destacan el potencial del LIPUS como un enfoque terapéutico no invasivo para el manejo de la CGS.