Un método de tinción fluorescente doble aumenta la sensibilidad del ensayo de micronúcleos con bloqueo de citocinesis
Autores: Udroiu, Ion
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Un método de tinción fluorescente doble aumenta la sensibilidad del ensayo de micronúcleos con bloqueo de citocinesis
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Prueba de micronúcleos
Ensayos de genotoxicidad
Células binucleadas bloqueadas en citocinesis
Naranja de acridina
Sensibilidad
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 24
Citaciones: Sin citaciones
La prueba del micronúcleo es una de las pruebas de genotoxicidad más populares. Para evitar la subestimación de las frecuencias de micronúcleos al contar células no replicantes, se ha desarrollado la prueba de micronúcleos bloqueados en citocinesis. En esta técnica, solo se cuentan las células binucleadas. Un problema subestimado es la dificultad potencial para discriminar entre células binucleadas y mononucleadas al usar tinción con DAPI, es decir, la posibilidad de que dos células mononucleadas vecinas puedan ser confundidas con una binucleada. El nuevo protocolo presentado aquí comprende la adición de naranja de acridina para teñir el citoplasma (además de DAPI para teñir núcleos y micronúcleos). Esta nueva técnica puede aumentar la sensibilidad de la prueba de micronúcleos bloqueados en citocinesis y evitar la subestimación de las frecuencias de micronúcleos, un problema importante cuando se emplean altas dosis.
Descripción
La prueba del micronúcleo es una de las pruebas de genotoxicidad más populares. Para evitar la subestimación de las frecuencias de micronúcleos al contar células no replicantes, se ha desarrollado la prueba de micronúcleos bloqueados en citocinesis. En esta técnica, solo se cuentan las células binucleadas. Un problema subestimado es la dificultad potencial para discriminar entre células binucleadas y mononucleadas al usar tinción con DAPI, es decir, la posibilidad de que dos células mononucleadas vecinas puedan ser confundidas con una binucleada. El nuevo protocolo presentado aquí comprende la adición de naranja de acridina para teñir el citoplasma (además de DAPI para teñir núcleos y micronúcleos). Esta nueva técnica puede aumentar la sensibilidad de la prueba de micronúcleos bloqueados en citocinesis y evitar la subestimación de las frecuencias de micronúcleos, un problema importante cuando se emplean altas dosis.