Azoxystrobin (AZO) se utiliza ampliamente para prevenir y tratar enfermedades fúngicas en cultivos importantes, pero también puede afectar a organismos no deseados, incluidos mamíferos, anfibios, organismos acuáticos y del suelo. Los colémbolos desempeñan roles importantes en los ecosistemas como descomponedores, consumidores de hongos y reguladores de microbios. Este estudio tuvo como objetivo investigar los efectos de AZO en los colémbolos mediante una prueba de reproducción y evaluar las respuestas de biomarcadores en diferentes intervalos de tiempo (3, 5, 7, 14 y 28 días). Los resultados mostraron que AZO afectó negativamente la reproducción a concentraciones de 50, 100 y 200 mg/kg, lo que resultó en disminuciones del 48,3%, 64,5% y 81,3%, respectivamente, en comparación con el control. La supervivencia de los adultos no se vio afectada. La CE50 estimada (reproducción) en suelo artificial fue de 61,28 mg/kg. Las respuestas de biomarcadores variaron con la concentración y el tiempo. Las concentraciones de proteínas y glucógeno aumentaron con el tiempo de exposición, mientras que el contenido de lípidos se vio afectado inicialmente pero volvió a niveles de control para el día 28. Los biomarcadores de estrés oxidativo (CAT, SOD, GST, TBARS) indicaron que AZO indujo estrés oxidativo, intensificándose con el tiempo. Después de 28 días, las concentraciones de MDA estaban significativamente elevadas en comparación con el control, lo que sugiere que el sistema antioxidante está abrumado, lo que causó daño a las membranas lipídicas. Este estudio demostró que azoxystrobin causó efectos negativos a nivel molecular y de población en especies no deseadas de colémbolos.