Los objetivos del estudio actual fueron evaluar las fluctuaciones en el rendimiento de producción, la fermentación del rumen y la comunidad microbiana en vacas lecheras en lactancia alimentadas con una dieta alta en granos (HG). En este estudio, se seleccionaron 16 vacas lecheras Holstein sanas con rendimientos de leche similares de 16.80 +/- 4.30 kg/día, días en leche 171.44 +/- 23.25 días y paridad 2.2 +/- 1.5 veces, y se asignaron aleatoriamente a dos grupos. Un grupo fue alimentado con una dieta baja en granos (LG; 40% de concentrado, base de MS; n = 8), y el otro grupo fue alimentado con una dieta alta en granos (HG; 60% de concentrado, base de MS; n = 8). El experimento duró 6 semanas, incluyendo 1 semana de adaptación. Los resultados experimentales mostraron que el contenido de grasa en la leche de las vacas lecheras en el grupo HG se redujo significativamente (< 0.05), y el contenido de nitrógeno ureico en leche (MUN) mostró una tendencia al aumento (0.05 < < 0.10) en comparación con el grupo LG. En comparación con el grupo LG, el pH del líquido ruminal se redujo significativamente después de alimentar con una dieta alta en granos, y los contenidos de ácidos grasos volátiles totales (TVFA), acetato, propionato y butirato aumentaron significativamente (< 0.05). La relación acetato/propionato disminuyó significativamente (< 0.05). El grupo HG aumentó significativamente la abundancia de y en el líquido ruminal mientras que redujo significativamente la abundancia de y (< 0.05). Los microorganismos con puntajes LDA > 2 se definieron como únicos, con el género bacteriano identificado como un biomarcador para el grupo LG, y los géneros bacterianos únicos en el grupo HG fueron , , y . Los resultados de la predicción de la función microbiana mostraron que se generaron un total de 18 vías diferenciales de KEGG entre los dos grupos de tratamiento, manifestándose principalmente en vías metabólicas, transducción de señales y el sistema inmunológico. En conclusión, el grupo HG promovió la fermentación del rumen al alterar la composición microbiana de las vacas lecheras. Nuestros hallazgos proporcionan una base teórica para el uso racional de dietas altas en granos para lograr altos rendimientos en la ganadería lechera intensiva.