La refinación del dolor representa un aspecto importante del bienestar animal en animales de laboratorio. La refinación de los regímenes de analgesia en ratones sometidos a craneotomía ha sido escasamente investigada. Aquí, buscamos investigar el efecto de la dexmedetomidina en combinación con otros fármacos analgésicos sobre los efectos anti-nociceptivos intraoperatorios y la estabilidad cardiorrespiratoria. Todos los ratones fueron anestesiados con isoflurano y recibieron infiltración local de lidocaína en el sitio quirúrgico. Los ratones fueron aleatorizados en grupos de tratamiento que consistían en carprofeno 5 mg/kg o meloxicam 5 mg/kg con o sin dexmedetomidina 0.1 mg/kg administrada por vía subcutánea. Las frecuencias cardíacas intra-anestésicas, las tasas de respiración, los requerimientos de isoflurano y las saturaciones de oxígeno arterial fueron monitoreadas continuamente. Encontramos que la administración de dexmedetomidina mejoró significativamente la estabilidad de la frecuencia cardíaca y respiratoria durante dos de cuatro estímulos nocivos (incisión de piel y estimulación de bigotes) en comparación con los ratones no tratados con dexmedetomidina y redujo los requerimientos de isoflurano durante la anestesia en un 5-6%. No se encontraron diferencias significativas entre carprofeno y meloxicam. Estos resultados demuestran que la dexmedetomidina reduce la nocicepción y proporciona estabilidad hemodinámica y respiratoria intra-anestésica en ratones. En conclusión, la adición de dexmedetomidina a los regímenes anestésicos para craneotomía ofrece una refinación sobre la práctica actual para ratones de laboratorio.