El virus de la fiebre porcina africana (ASFV) es un gran virus de ADN de doble cadena que es altamente infeccioso y afecta seriamente a los cerdos domésticos y jabalíes. La fiebre porcina africana (ASF) ha causado enormes pérdidas económicas a los países y regiones endémicas. En la actualidad, todavía falta una vacuna y terapias efectivas. Por lo tanto, la detección rápida y precisa es esencial para la prevención y control de la ASF. El método de detección por tira de flujo lateral mediado por endonucleasa de ADN portátil (Cas12a) combinado con amplificación de polimerasa recombinante (RPA) ha sido gradualmente reconocido como efectivo para la detección de virus, incluido el ASFV. En este estudio, se estableció un método de detección RPA-Cas12a-LFS basado en el gen de la proteína estructural p17 del ASFV (D117L). El método de detección exhibe una sensibilidad de hasta dos copias de genes y no tiene reacciones cruzadas con otros nueve virus porcinos. Así, el método es altamente sensible y específico. En 68 muestras clínicas, la tasa de coincidencia de la tira p17 fue del 100%, en comparación con la PCR cuantitativa tradicional (qPCR). En conclusión, hemos desarrollado un método de detección visual del ASFV que es simple, rápido, sensible y específico, y hemos demostrado el potencial de la detección in situ del ASFV.