Amplificación Isotérmica Mediated por Triplex-Loop Combinada con un Inmunoensayo de Flujo Lateral para la Detección Simultánea de Tres Patógenos del Síndrome de Diarrea Viral Porcina en Cerdos
Autores: Hong, Yi; Ma, Biao; Li, Jiali; Shuai, Jiangbing; Zhang, Xiaofeng; Xu, Hanyue; Zhang, Mingzhou
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Amplificación Isotérmica Mediated por Triplex-Loop Combinada con un Inmunoensayo de Flujo Lateral para la Detección Simultánea de Tres Patógenos del Síndrome de Diarrea Viral Porcina en Cerdos
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Virus de la diarrea epidémica porcina
Bocavirus porcino
Rotavirus porcino
Amplificación isotérmica mediada por bucle triplex
Tira reactiva de flujo lateral
Detección.
Licencia
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Citaciones: Sin citaciones
El virus de la diarrea epidémica porcina (PEDV), el bocavirus porcino (PBoV) y el rotavirus porcino (PoRV) están asociados con la diarrea viral porcina. En este estudio, se estableció una amplificación isotérmica mediada por bucle en triplex (LAMP) combinada con una tira reactiva de flujo lateral (LFD) para la detección simultánea de PEDV, PoRV y PBoV. Se seleccionaron los genes de PEDV, PoRV y PBoV para diseñar los cebadores de LAMP. La amplificación se pudo llevar a cabo a 64 grados C utilizando un baño metálico en miniatura en 30 minutos. El ensayo triplex LAMP-LFD no mostró reacciones cruzadas con otros patógenos porcinos. Los límites de detección (LOD) de PEDV, PoRV y PBoV fueron de 2.40 x 10 copias/L, 2.89 x 10 copias/L y 2.52 x 10 copias/L, respectivamente. La consistencia entre rt-qPCR y el triplex LAMP-LFD fue superior al 99% en las pruebas de muestras de campo. En general, el ensayo triplex LAMP-LFD fue adecuado para la detección rápida y simultánea de los tres virus en el campo.
Descripción
El virus de la diarrea epidémica porcina (PEDV), el bocavirus porcino (PBoV) y el rotavirus porcino (PoRV) están asociados con la diarrea viral porcina. En este estudio, se estableció una amplificación isotérmica mediada por bucle en triplex (LAMP) combinada con una tira reactiva de flujo lateral (LFD) para la detección simultánea de PEDV, PoRV y PBoV. Se seleccionaron los genes de PEDV, PoRV y PBoV para diseñar los cebadores de LAMP. La amplificación se pudo llevar a cabo a 64 grados C utilizando un baño metálico en miniatura en 30 minutos. El ensayo triplex LAMP-LFD no mostró reacciones cruzadas con otros patógenos porcinos. Los límites de detección (LOD) de PEDV, PoRV y PBoV fueron de 2.40 x 10 copias/L, 2.89 x 10 copias/L y 2.52 x 10 copias/L, respectivamente. La consistencia entre rt-qPCR y el triplex LAMP-LFD fue superior al 99% en las pruebas de muestras de campo. En general, el ensayo triplex LAMP-LFD fue adecuado para la detección rápida y simultánea de los tres virus en el campo.