La detección de la fitoplasma de la flavescencia dorada en extractos crudos del vector mediante LAMP en campo
Autores: Mati, Slavica; Candian, Valentina; D"Errico, Chiara; Pierro, Roberto; Panno, Stefano; Davino, Salvatore; Noris, Emanuela; Tedeschi, Rosemarie
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
2022
La detección de la fitoplasma de la flavescencia dorada en extractos crudos del vector mediante LAMP en campo
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Agronomía y Ciencia de los Cultivos
Palabras clave
Enfermedad
Vid
Fitoplasma de la Flavescencia Dorada
LAMP
Vectores de insectos
Detección
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 42
Citaciones: Sin citaciones
Una de las enfermedades más destructivas que afecta a la vid en Europa es causada por el fitoplasma de la Flavescencia Dorada (FDp), que pertenece al grupo 16Sr-V y es un patógeno de cuarentena de la Unión Europea. Aunque muchas técnicas moleculares como la amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) se utilizan ampliamente para la detección rápida de FDp en plantas de vid infectadas, no existe un ensayo de amplificación isotérmica desarrollado para la detección de FDp en los vectores de insectos que son fundamentales para la propagación de la enfermedad. Por esta razón, se optimizó y desarrolló un protocolo simple de LAMP en tiempo real en el campo para la detección específica de FDp en el vector de insectos. El ensayo de LAMP se optimizó para funcionar con extractos crudos de insectos obtenidos agitando manualmente un solo insecto en un buffer durante 5 minutos. Este ensayo de LAMP simple, sensible, específico, económico y fácil de usar permitió la detección de FDp en menos de media hora, directamente en el campo. El procedimiento de preparación de tejido de insectos desarrollado, combinado con el protocolo de LAMP, reveló rápidamente la presencia de FDp en los insectos infectados directamente en los viñedos, lo que permitió monitorear la propagación del patógeno en el campo y aplicar estrategias oportunas requeridas para el control obligatorio de este patógeno.
Descripción
Una de las enfermedades más destructivas que afecta a la vid en Europa es causada por el fitoplasma de la Flavescencia Dorada (FDp), que pertenece al grupo 16Sr-V y es un patógeno de cuarentena de la Unión Europea. Aunque muchas técnicas moleculares como la amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) se utilizan ampliamente para la detección rápida de FDp en plantas de vid infectadas, no existe un ensayo de amplificación isotérmica desarrollado para la detección de FDp en los vectores de insectos que son fundamentales para la propagación de la enfermedad. Por esta razón, se optimizó y desarrolló un protocolo simple de LAMP en tiempo real en el campo para la detección específica de FDp en el vector de insectos. El ensayo de LAMP se optimizó para funcionar con extractos crudos de insectos obtenidos agitando manualmente un solo insecto en un buffer durante 5 minutos. Este ensayo de LAMP simple, sensible, específico, económico y fácil de usar permitió la detección de FDp en menos de media hora, directamente en el campo. El procedimiento de preparación de tejido de insectos desarrollado, combinado con el protocolo de LAMP, reveló rápidamente la presencia de FDp en los insectos infectados directamente en los viñedos, lo que permitió monitorear la propagación del patógeno en el campo y aplicar estrategias oportunas requeridas para el control obligatorio de este patógeno.