Detección y diagnóstico de por anticuerpos monoclonales específicos
Autores: Gorris, María Teresa; Sanz, Antonio; Peñalver, Javier; López, María M.; Colomer, Mario; Marco-Noales, Ester
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2020
Acceso abierto
Artículo científico
2020
Detección y diagnóstico de por anticuerpos monoclonales específicos
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Agronomía y Ciencia de los Cultivos
Palabras clave
Anticuerpos
Monoclonal
Hibridoma
Cepa
MAb
Detección
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 20
Citaciones: Sin citaciones
Los anticuerpos monoclonales (MAb) específicos se obtuvieron mediante tecnología de hibridoma utilizando antígenos O somáticos tratados térmicamente de la cepa LMG 17159. Se seleccionaron diez clones de hibridoma estables que secretan MAb y se determinó su isotipo. Los MAb 2G1/PPD, IgG mostraron especificidad para , detectando todas las cepas analizadas que representan diferentes subespecies, STs y hospedadores. También se produjeron anticuerpos policlonales (PAb) contra y se seleccionó el suero 17159-O/IVIA por su mayor título y excelente capacidad de detección. MAb 2G1/PPD se probó contra la cepa IVIA 5235 en PBS y en muestras de extracto crudo contaminadas de almendra, oliva, cítricos y otros hospedadores y su sensibilidad por DAS-ELISA fue de 10 CFU mL. El MAb también reaccionó con alta afinidad y avidez contra por DASI-ELISA y Tissue print-ELISA. Se calcularon los parámetros diagnósticos de DAS-ELISA basados en MAb y se compararon con el estándar de oro de la PCR en tiempo real. La especificidad diagnóstica de MAb 2G1/PPD fue del 100%, la sensibilidad diagnóstica fue del 88.5% en comparación con la PCR en tiempo real de Harper y del 89.9% en comparación con la PCR en tiempo real de Francis. La concordancia entre las técnicas fue casi perfecta según el índice kappa de Cohen estimado, incluso en árboles de almendra asintomáticos. Las técnicas inmunológicas desarrolladas representan herramientas de análisis sostenibles y económicas, basadas en MAb específicos, homogéneos y bien caracterizados, que se pueden obtener en cantidades ilimitadas de manera reproducible y constituyen una garantía para la estandarización de kits comerciales. Son una opción valiosa dentro de una estrategia polifásica para la detección de .
Descripción
Los anticuerpos monoclonales (MAb) específicos se obtuvieron mediante tecnología de hibridoma utilizando antígenos O somáticos tratados térmicamente de la cepa LMG 17159. Se seleccionaron diez clones de hibridoma estables que secretan MAb y se determinó su isotipo. Los MAb 2G1/PPD, IgG mostraron especificidad para , detectando todas las cepas analizadas que representan diferentes subespecies, STs y hospedadores. También se produjeron anticuerpos policlonales (PAb) contra y se seleccionó el suero 17159-O/IVIA por su mayor título y excelente capacidad de detección. MAb 2G1/PPD se probó contra la cepa IVIA 5235 en PBS y en muestras de extracto crudo contaminadas de almendra, oliva, cítricos y otros hospedadores y su sensibilidad por DAS-ELISA fue de 10 CFU mL. El MAb también reaccionó con alta afinidad y avidez contra por DASI-ELISA y Tissue print-ELISA. Se calcularon los parámetros diagnósticos de DAS-ELISA basados en MAb y se compararon con el estándar de oro de la PCR en tiempo real. La especificidad diagnóstica de MAb 2G1/PPD fue del 100%, la sensibilidad diagnóstica fue del 88.5% en comparación con la PCR en tiempo real de Harper y del 89.9% en comparación con la PCR en tiempo real de Francis. La concordancia entre las técnicas fue casi perfecta según el índice kappa de Cohen estimado, incluso en árboles de almendra asintomáticos. Las técnicas inmunológicas desarrolladas representan herramientas de análisis sostenibles y económicas, basadas en MAb específicos, homogéneos y bien caracterizados, que se pueden obtener en cantidades ilimitadas de manera reproducible y constituyen una garantía para la estandarización de kits comerciales. Son una opción valiosa dentro de una estrategia polifásica para la detección de .