El cambio climático puede tener importantes consecuencias en la distribución de las plantas porque los entornos locales podrían cambiar más rápido que el ritmo de la selección natural y la adaptación de las poblaciones silvestres y cultivares de forrajes perennes. La temperatura es un factor principal que afecta la germinación de semillas y los procesos de crecimiento heterotrófico primario. (L.) es la leguminosa forrajera más importante a nivel mundial. La cría acelerada de cultivares de alfalfa adaptados a nuevos rangos de temperatura podría ser necesaria bajo la mayoría de los escenarios climáticos futuros. Este trabajo tiene como objetivo explorar la diversidad genética de una muestra de accesiones en respuesta a la temperatura durante la germinación de semillas y el crecimiento heterotrófico de plántulas. Las semillas o plántulas se colocaron en la oscuridad bajo ocho temperaturas constantes en el rango de 5 grados C a 40 grados C. Las semillas germinadas se contaron manualmente, mientras que el crecimiento del hipocótilo y la raíz se estimaron utilizando análisis de imágenes y ajuste de curvas. Los análisis multivariantes destacaron vínculos entre las respuestas y el origen de las accesiones. La variabilidad fue alta, tanto dentro como entre accesiones, para todas las variables de respuesta. Las accesiones mostraron diferencias significativas en sus curvas de respuesta no lineales en términos de germinabilidad, tasas de germinación y tasas de elongación relativa. Sin embargo, las diferencias fueron más notables en las tasas y proporciones de germinación en comparación con el crecimiento heterotrófico de plántulas. En consecuencia, estos podrían ser más fáciles de usar como marcadores tempranos para la selección y cría de alfalfa en el futuro.