La resistencia antimicrobiana representa un desafío crítico para la salud global, afectando la salud humana, animal y ambiental. Las aves silvestres, debido a su movilidad y diversidad ecológica, son cada vez más reconocidas como portadoras y propagadoras potenciales de bacterias resistentes. En este estudio, examinamos aves silvestres que murieron en un centro de rescate de vida silvestre en el norte de Italia para investigar la presencia de bacterias Gram-negativas en su tracto intestinal y evaluar sus perfiles de resistencia antimicrobiana. Se recolectaron muestras cloacales de 112 aves. Se identificaron un total de 157 aislamientos bacterianos Gram-negativos, incluyendo especies clínicamente significativas. Notablemente, muchos aislamientos mostraron resistencia a antimicrobianos de primera línea y críticos, incluyendo aquellos reservados para la medicina humana. Además, varios aislamientos mostraron patrones de resistencia que sugieren mecanismos que mejoran aún más su capacidad para resistir el tratamiento. La resistencia fue más pronunciada en aves carnívoras, carroñeras y migratorias. Estos hallazgos destacan el importante papel que las aves silvestres pueden desempeñar en la diseminación ambiental de la resistencia antimicrobiana y subrayan la necesidad de incluirlas en programas de vigilancia, apoyando un enfoque de Una Salud.