La vida promedio de un perro se mantiene generalmente entre diez y quince años, y los tumores son la razón predominante que conduce a la muerte de los perros, especialmente el carcinoma mamario canino. Por lo tanto, el diagnóstico temprano de tumores es muy importante. En este estudio, el tamaño, la morfología y la textura del tumor se podían observar a través del examen clínico general, la metástasis tumoral se podía ver a través del examen por imágenes, las reacciones inflamatorias se podían observar a través del examen hematológico, y la morfología celular anormal se podía ver a través del examen citológico e histopatológico. En los 269 casos malignos y 179 casos benignos, seleccionamos aleatoriamente 30 casos de cada uno, y se seleccionaron 30 perros sanos adicionales para el experimento (perros sanos: perros en buenas condiciones físicas sin ningún tumor u otras enfermedades). Utilizamos RT-qPCR y ELISA para determinar la expresión relativa del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), la proteína tumoral P53 (P53), la ferritina sérica (SF) y la proteína 3 del receptor tipo NOD (NLRP3) en 30 perros sanos, 30 perros con tumores mamarios benignos y 30 perros con tumores mamarios malignos. En los resultados, se obtuvo la misma tendencia de expresión tanto en suero como en tejidos, y la expresión de los cuatro marcadores fue la más alta en tumores mamarios malignos, con diferencias altamente significativas en comparación con los grupos benignos y sanos/paracancerosos. Al trazar las curvas ROC, se encontró que los resultados de las pruebas combinadas eran mejores que una prueba única y la combinación de los cuatro marcadores fue la mejor para el diagnóstico temprano. En conclusión, esto puede ayudar al diagnóstico clínico temprano hasta cierto punto, y también proporciona algunas referencias y asistencia para el desarrollo de kits de detección de tumores en la práctica clínica.