Si bien la espectroscopia de fuerza de molécula única ha avanzado enormemente en el estudio del plegamiento de proteínas, existen limitaciones en lo que se puede aprender al estudiar el efecto de la fuerza sola. Desarrollamos una técnica novedosa, el despliegue químico-mecánico, que combina múltiples perturbantes -fuerza y desnaturalizante químico- para caracterizar más completamente el proceso de plegamiento al sondar simultáneamente múltiples parámetros estructurales -el cambio en la distancia de extremo a extremo y el área de superficie accesible al solvente. Aquí, describimos el trasfondo teórico, el diseño experimental y el análisis de datos para experimentos de despliegue químico-mecánico que exploran la termodinámica y cinética del plegamiento de proteínas. Esta técnica se ha aplicado para caracterizar vías de plegamiento de proteínas paralelas, el estado desnaturalizado de la proteína, el plegamiento de proteínas en el ribosoma e intermediarios de plegamiento de proteínas.