Los péptidos representan un desafío en el desarrollo de fármacos debido a sus cortas vidas medias in vivo. En este estudio, realizamos experimentos de degradación in vitro en SAIF, que es un péptido derivado de tiburón que previamente estudiamos. Los fragmentos de degradación fueron secuenciados y se identificó una secuencia de péptido truncada. Luego, el péptido truncado fue clonado y expresado a través de un sistema de clonación sin rastro para formar un nuevo péptido cíclico en condiciones de oxidación in vitro mediante la formación de un enlace disulfuro entre los extremos N y C, que fue nombrado ctSAIF. ctSAIF mostró una alta actividad anti-HCC y una mayor estabilidad enzimática in vitro, y conservó la actividad antitumoral y una buena biocompatibilidad en la circulación sistémica en un modelo de xenoinjerto de HCC. Nuestro estudio descubrió y caracterizó un nuevo péptido cíclico derivado de tiburón con actividad antitumoral, sentando las bases para su desarrollo futuro como candidato a fármaco antitumoral. El estudio también proporcionó una nueva solución para el desarrollo de fármacos peptídicos.