La tuberculosis (TB) sigue siendo una amenaza significativa para la salud pública, con un aumento de la resistencia a los medicamentos y una alta incidencia en múltiples áreas del mundo. En la búsqueda de nuevos agentes antituberculosos, este estudio explora la aplicación de un enfoque de redes moleculares guiadas por bioactividad para identificar compuestos bioactivos de siete especies de plantas recolectadas en Guayana Francesa. Utilizando extracción asistida por ultrasonido seguida de partición líquido-líquido y análisis UHPLC-HRMS/MS, se probó una biblioteca de 72 muestras. Las fracciones no polares de las muestras mostraron la mayor actividad. La integración de datos metabolómicos y de bioensayos en redes moleculares permitió la priorización y anotación de compuestos activos, revelando que los flavonoides contribuyen a la actividad antituberculosa de las muestras activas. Además, el uso de herramientas computacionales como GNPS, SIRIUS y TIMA-R permitió la dereplicación y aumentó la confianza en la predicción estructural de metabolitos activos. Este enfoque demostró su potencial para acelerar la identificación de compuestos bioactivos tanto conocidos como nuevos sin requerir una aislamiento exhaustivo, ofreciendo una estrategia robusta para el desarrollo de fármacos basados en productos naturales contra la TB.