La técnica de aspiración laparoscópica de oocitos se ha utilizado cada vez más en animales; sin embargo, hay pocos registros de su uso en búfalos. Para describir esta técnica, se utilizaron seis búfalos Murrah lactantes de entre 3 y 5 meses. Se realizaron tres laparoscopias de ovocitos en cada animal, con intervalos de 15 días entre cirugías, completando un total de 18 procedimientos. La técnica utilizó tres puertos quirúrgicos con ópticas y una cámara de video de alta definición. La introducción del primer puerto y la insuflación del abdomen se realizaron a través de la técnica abierta, con aspiración utilizando una aguja de 20 G transabdominalmente y una bomba de vacío calibrada a 50 mmHg. El tiempo quirúrgico completo promedio desde la anestesia hasta la extracción del animal de la camada fue de 49 +/- 9.8 min. Hubo un 27.8% de casos de insuflación en el lado incorrecto del omento. La tasa de recuperación de oocitos del 60.3% se mantuvo dentro del rango normal. Sin embargo, la tasa de oocitos viables recuperados fue baja, con solo el 40.8% de los recuperados sometidos a producción de embriones in vitro (IVEP). Estos datos demuestran que esta técnica simple y mínimamente invasiva es una excelente herramienta reproductiva para la mejora genética de las especies de búfalos.