El uso generalizado de agroquímicos genera preocupaciones sobre los impactos ambientales, particularmente en los polinizadores, como las abejas, que sirven como bioindicadores de contaminación. Desarrollar métodos para evaluar los riesgos de contaminación en bioindicadores apoya los marcos regulatorios, incluidas las regulaciones de la UE sobre los límites máximos de residuos (LMR) para pesticidas en alimentos y el medio ambiente. Este estudio presenta el desarrollo y la validación de dos métodos analíticos complementarios (LC-MS/MS e IC-HRMS) para la detección y cuantificación de pesticidas altamente polares (HPP) en matrices de abejas. Ambos métodos fueron validados de acuerdo con el documento SANTE/11312/2021 v2. LC-MS/MS fue validado con un límite de cuantificación (LOQ) de 0.005 mg/kg para todos los analitos. La repetibilidad en 0.005, 0.010, 0.020 y 0.100 mg/kg mostró un RSD del 1.6% al 19.7% y recuperaciones entre el 70% y el 119%. La precisión interlaboratorio en 0.020 mg/kg en dos laboratorios mostró un RSD del 5.5% al 13.6%, con recuperaciones entre el 91% y el 103%. El método IC-HRMS logró LOQs de 0.01 mg/kg (glufosinato, N-acetil glufosinato, MPPA, glifosato, N-acetil glifosato, N-acetil AMPA) y 0.1 mg/kg (fosetil, ácido fosfónico, AMPA), con recuperaciones medias en condiciones de repetibilidad del 84% al 114% y RSD del 2% al 14%. La precisión intralaboratorio mostró recuperaciones medias del 87% al 119%, con valores de RSD entre el 10% y el 18%. Estos métodos permiten un monitoreo preciso de la contaminación por HPP, apoyando la evaluación de riesgos y la agricultura sostenible.