Optimizar el uso de agentes de biocontrol (ABC) requiere el seguimiento temporal de poblaciones viables en la filósfera de los cultivos para asegurar que se pueda lograr un control efectivo. No existen sistemas sensibles para cuantificar poblaciones viables de ABC comercialmente disponibles, como y , en la filósfera de las plantas de cultivo. El objetivo de este estudio fue desarrollar un método para cuantificar poblaciones viables de estos dos ABC en la filósfera de los cultivos. Se desarrolló una herramienta molecular basada en monoazida de propidio (PMA) (PMAxx(tm)-qPCR) capaz de cuantificar poblaciones viables de estos dos ABC. Las muestras fueron tratadas con PMAxx(tm) (12.5-100 M), seguidas de una incubación de 15 minutos, exposición a una luz halógena de 800 W durante 30 minutos, extracción de ADN y cuantificación utilizando qPCR. Esto proporcionó una plataforma para utilizar la técnica PMAxx(tm)-qPCR para ambos ABC para diferenciar células viables de células muertas. El número máximo de células muertas bloqueadas, basado en el ADN, fue de 3.44 log para y 5.75 log para . Los estudios de validación mostraron que esto permitió una cuantificación precisa de células viables. Este método proporcionó una cuantificación efectiva de los cambios temporales en las poblaciones viables de los ABC en formulaciones comerciales sobre hojas de lechuga en sistemas de producción en invernadero y túneles de polietileno.