Desarrollo y Validación de un Ensayo Basado en RAA-CRISPR/Cas12a para la Detección del Rotavirus Porcino
Autores: Huang, Siyu; Du, Longhuan; Liu, Song; Yang, Qingcheng; Lei, Changwei; Wang, Hongning; Yang, Liu; Yang, Xin
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Desarrollo y Validación de un Ensayo Basado en RAA-CRISPR/Cas12a para la Detección del Rotavirus Porcino
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Rotavirus porcino
Deshidratación
Lechones lactantes
RAA
Tecnología CRISPR
Pérdidas económicas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
El rotavirus porcino es un virus de diarrea significativo en la cría de cerdos, causando particularmente deshidratación fatal en lechones lactantes menores de 7 días, lo que resulta en pérdidas económicas sustanciales para la industria porcina. En este estudio, hemos establecido un sistema de detección y análisis rápido para el rotavirus porcino del Grupo A utilizando Amplificación Asistida por Recombinasa (RAA) combinada con la tecnología de Repeticiones Palindrómicas Cortas Agrupadas y Regularmente Interespaciadas (CRISPR) por primera vez. El plásmido recombinante PoRV logró una respuesta de alta sensibilidad en 30 minutos a 37 grados C con un límite de detección tan bajo como 2.43 copias/L, lo que representa una sensibilidad 10 veces mayor en comparación con el método qPCR. Los resultados de las pruebas de especificidad mostraron que el análisis RAA-CRISPR/Cas12a para el rotavirus porcino no reaccionó con otros virus comunes de diarrea porcina. Además, este método permite la visualización de resultados utilizando luz azul, lo que hace que este método de detección preciso y portátil tenga un gran potencial para el control del rotavirus en la cría de cerdos.
Descripción
El rotavirus porcino es un virus de diarrea significativo en la cría de cerdos, causando particularmente deshidratación fatal en lechones lactantes menores de 7 días, lo que resulta en pérdidas económicas sustanciales para la industria porcina. En este estudio, hemos establecido un sistema de detección y análisis rápido para el rotavirus porcino del Grupo A utilizando Amplificación Asistida por Recombinasa (RAA) combinada con la tecnología de Repeticiones Palindrómicas Cortas Agrupadas y Regularmente Interespaciadas (CRISPR) por primera vez. El plásmido recombinante PoRV logró una respuesta de alta sensibilidad en 30 minutos a 37 grados C con un límite de detección tan bajo como 2.43 copias/L, lo que representa una sensibilidad 10 veces mayor en comparación con el método qPCR. Los resultados de las pruebas de especificidad mostraron que el análisis RAA-CRISPR/Cas12a para el rotavirus porcino no reaccionó con otros virus comunes de diarrea porcina. Además, este método permite la visualización de resultados utilizando luz azul, lo que hace que este método de detección preciso y portátil tenga un gran potencial para el control del rotavirus en la cría de cerdos.