El objetivo de este estudio fue desarrollar un ELISA indirecto utilizando un anticuerpo policlonal contra la proteína VP6 del rotavirus bovino (BRV). Para lograr esto, se construyó pcDNA3.1-VP6, un plásmido de expresión eucariota recombinante, basado en la secuencia del gen conservado VP6 del BRV y se transfirió a células CHO-K1 utilizando el método de transfección transitoria. La proteína VP6 se purificó como el antígeno de recubrimiento utilizando cromatografía de afinidad por iones de níquel, y posteriormente se estableció un ELISA indirecto. El estudio encontró que la concentración óptima de recubrimiento para la proteína VP6 fue de 1 g/mL. La solución de bloqueo óptima fue de 3% de leche desnatada, y el tiempo de bloqueo fue de 120 minutos. El anticuerpo secundario se diluyó a 1:4000, y el tiempo de incubación para el anticuerpo secundario fue de 30 minutos. Un resultado positivo se indicó cuando el OD450 del suero fue mayor o igual a 0.357. Los coeficientes de variación fueron inferiores al 10% tanto dentro como entre lotes, lo que indica la buena reproducibilidad del método. El estudio encontró que el resultado de la prueba fue positivo cuando la dilución del suero fue 2, lo que indica la alta sensibilidad del método. Se probaron un total de 24 sueros positivos y 40 sueros negativos utilizando el ELISA bien establecido. El estudio también estableció un ensayo de ELISA indirecto con buena especificidad y sensibilidad para la detección de anticuerpos contra el rotavirus bovino. En general, los resultados sugieren que el método de ELISA indirecto desarrollado en este estudio es una prueba efectiva para detectar dichos anticuerpos.