La oxidasa alternativa mitocondrial 1a (AOX1a) desempeña un papel extremadamente importante en el nodo crítico de la viabilidad de las semillas durante el almacenamiento. Sin embargo, el mecanismo regulador aún se comprende poco. El objetivo de este estudio fue identificar los mecanismos regulatorios comparando las semillas de arroz -RNAi y de tipo salvaje (WT) durante el tratamiento de envejecimiento artificial. El aumento de peso y el tiempo para que el porcentaje de germinación de las semillas disminuyera al 50% en las semillas de arroz -RNAi, lo que indica un posible deterioro en el desarrollo y la capacidad de almacenamiento de las semillas. En comparación con las semillas WT al 100%, 90%, 80% y 70% de germinación, el consumo de O dependiente de NADH y succinato, la actividad de la malato deshidrogenasa mitocondrial y los contenidos de ATP disminuyeron en las semillas -RNAi, lo que indica que el estado mitocondrial en las semillas -RNAi después de la imbibición era más débil que en las semillas WT. Además, la reducción en la abundancia de subunidades del Complejo I mostró que la capacidad de la cadena de transporte de electrones mitocondrial estaba significativamente inhibida en las semillas -RNAi en el nodo crítico de la viabilidad de las semillas. Los resultados indican que la producción de ATP estaba deteriorada en las semillas -RNAi durante el envejecimiento. Por lo tanto, concluimos que el metabolismo mitocondrial y las vías alternativas estaban severamente inhibidos en las semillas -RNAi en el nodo crítico de viabilidad, lo que podría acelerar el colapso de la viabilidad de las semillas. El mecanismo regulador preciso de la vía alternativa en el nodo crítico de viabilidad necesita ser analizado más a fondo. Este hallazgo podría proporcionar la base para desarrollar indicadores de monitoreo y advertencia cuando la viabilidad de las semillas disminuye al nodo crítico durante el almacenamiento.