La escasez de tejidos y órganos dañados llevó al desarrollo de la ingeniería de tejidos. Los andamios biológicos, creados a partir de la matriz extracelular (ECM) de órganos y tejidos, han surgido como una solución prometedora para los trasplantes. La ECM del cartílago auricular decelularizado es una herramienta potencial para producir andamios ideales para la recelularización e implantación de nuevo tejido en áreas dañadas. Para ser clasificado como un andamio ideal, debe ser acelular, preservando sus proteínas y características físicas necesarias para la adhesión celular. Este estudio tuvo como objetivo desarrollar un protocolo de decelularización para el cartílago de oreja de cerdo y evaluar la integridad de la ECM. Se realizaron cuatro pruebas utilizando diferentes métodos y protocolos, con cuatro orejas de cerdo de las cuales se eliminó la piel y el tejido subcutáneo, dejando solo el cartílago. El protocolo más eficiente fue la combinación de tripsina con una solución de hidróxido de sodio (0,2 N) y SDS (1%) sin alterar la conformación de la ECM o la arquitectura del colágeno. En conclusión, se observó que el cartílago auricular es difícil de decelularizar, influenciado por el tamaño del material, el tiempo de exposición y la composición de la solución. La congelación y descongelación no afectaron el procedimiento. El grosor de la muestra impactó significativamente el tiempo de decelularización.