Este estudio tuvo como objetivo evaluar el impacto de la siembra intercalada con tres gramíneas perennes (L., L. y L.) bajo diferentes niveles de disponibilidad de hierro (Fe) (Fe0, Fe1 y Fe5) en soluciones nutritivas. La investigación se centró en la acumulación de biomasa, la eficiencia fotosintética, el desarrollo radicular, la absorción de nutrientes y la respuesta al estrés oxidativo. En ausencia de Fe, la especie sp. mostró clorosis, reducción de biomasa y aumento de la actividad de la enzima reductasa de quelato férrico (FCR) como respuesta adaptativa. Las plantas intercaladas con la especie sp. mantuvieron niveles más altos de clorofila (Chl) y eficiencia del fotosistema II (valores F/F), mitigando los efectos de la deficiencia de Fe. La actividad de la catalasa y la producción de polifenoles variaron con las especies intercaladas, lo que indica mecanismos de respuesta al estrés diferenciales. La siembra intercalada mejoró la acumulación de Zn, Mn y P, siendo la especie sp. la que facilitó una mayor absorción de Zn y Mn. La siembra intercalada de especies específicas de gramíneas ofrece beneficios agronómicos potenciales al mejorar la eficiencia en el uso de Fe, mitigar el estrés y aumentar la absorción de nutrientes. La investigación futura debería centrarse en optimizar combinaciones de siembra intercalada para prácticas agrícolas sostenibles.